毛皮兽阿留申病毒可视化交叉等温扩增检测方法的建立及初步应用

作者：韦韬; 吴艳虹; 马瑞芳; 丛丽; 岳志刚; 赵永强; 肖家美; 邵西群^*

来源：中国兽医科学, 2019, 49(06): 671-677.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0100

• 水貂阿留申病毒
• 阿留申病毒
• 交叉引物等温扩增
• 可视化检测

为建立快速、特异、灵敏的毛皮兽阿留申病毒可视化交叉引物等温扩增检测方法(CPA),以阿留申病毒属内病毒序列为参考,在VP2序列高变区保守区段设计合成4条特异引物。通过优化CPA反应条件,建立了毛皮兽阿留申病毒可视化交叉引物等温扩增检测方法,并进行了特异性、敏感性试验以及对临床样品的检测。结果显示,该方法可扩增水貂阿留申病毒(AMDV)和狐貉阿留申病毒(RFAV),对犬科和水貂组织以及常见病毒无特异性反应;对AMDV、RFAV可视化检测下限分别为5.38×102copies/μL、5. 93×102copies/μL;对83份临床样品的检测结果显示,其中有16份PCR检测为阴性,CPA、qPCR检测为阳性的样品,表明CPA检测方法优于传统PCR。本试验建立了一种高敏感性、特异性检测毛皮兽阿留申病毒的方法,通过添加荧光染料实现了可视化检测,它更加适合基层兽医站、养殖场进行快速核酸检测。

• 单位
  中国农业科学院特产研究所