N-myc下游调节基因2在膀胱癌细胞凋亡中对信号转导和转录激活因子3信号通路的影响

作者：赵阳; 马曜辉; 翟晓磊; 张楠; 单中杰

来源：中华泌尿外科杂志, 2017, 38(07): 537-541.

• 膀胱肿瘤
• N-myc下游调节基因2
• 信号转导和转录激活因子3
• 凋亡

目的探讨N-myc下游调节基因2(N-myc downstream regulated gene 2,NDRG2)在膀胱癌细胞凋亡中对信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路的影响。方法 2014年12月至2015年8月采用蛋白质印迹法检测人膀胱癌细胞BIU-87和膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1中NDRG2的表达水平。分别用空载体(pcDNA3.1)、过表达NDRG2的载体(pc.DNA3.1/NDRG2)、NDRG2小干扰RNA(siRNA-NDRG2)和对照siRNA转染NDRG2细胞,并分别命名为pcDNA3.1组、pcDNA3.1/NDRG2组、siRNA-NDRG2组和siRNA对照组。培养48h后,蛋白质印迹法检测NDRG2、Cleaved caspase 3、STAT3、p-STAT3、JAK2、p-JAK2表达水平,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况。BIU-87与45μmol/L的STAT3信号通路抑制剂AG490作用48h后,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测Cleaved caspase 3、STAT3、p-STAT3、JAK2、p-JAK2表达水平。结果 NDRG2在膀胱癌细胞中的表达水平(0.016±0.001)低于膀胱上皮永生化细胞(0.096±0.003)。pcDNA3.1/NDRG2组细胞存活率(40.32±0.06)%显著低于pcDNA3.1组(100.00±0.02)%,差异有统计学意义(P<0.01)。siRNANDRG2组细胞存活率(135.74±0.04)%高于siRNA对照组(100.01±0.05)%。pcDNA3.1/NDRG2组细胞凋亡率(28.64±0.05)%高于pcDNA3.1组(11.21±0.03)%,差异有统计学意义(P<0.01)。siRNA-NDRG2组细胞凋亡率(6.31±0.05)%低于siRNA对照组(10.32±0.07)%,差异有统计学意义(P<0.01)。pcDNA3.1/NDRG2组细胞中p-STAT3(0.11±0.04)、p-JAK2(0.13±0.03)的表达水平低于pcDNA3.1组(0.29±0.06、0.32±0.03),差异有统计学意义(P<0.01)。AG490作用后BIU-87的细胞存活率和凋亡率与转染pcDNA3.1/NDRG2后的趋势一致。结论 NDRG2能够促进膀胱癌细胞凋亡,作用机制与STAT3信号通路有关。

• 单位
  郑州人民医院