钙激活核苷酸酶1敲低对肾透明细胞癌769-P细胞增殖和迁移的影响

作者：刘鑫; 刘小兵; 刘骞; 王青青; 杨振兴; 李龙坤

来源：第三军医大学学报, 2018, 40(06): 473-478.

DOI：10.16016/j.1000-5404.201711057

• 肾透明细胞癌
• 钙激活核苷酸酶1
• 细胞增殖
• 细胞迁移
• 细胞凋亡

目的探究钙激活核苷酸酶1(calcium-activated nucleotidase 1,CANT1)对人肾透明细胞癌769-P细胞系增殖和迁移的影响,并对其作用机制进行初步探讨。方法免疫组化检测临床肿瘤及癌旁组织CANT1的表达差异。包装携带干扰CANT1的shRNA及空白对照shRNA慢病毒,并转染769-P细胞系,采用RT-PCR和Western blot分别在mRNA及蛋白水平验证shRNA干扰效率。稳定转染后,采用CCK-8和划痕实验分别检测细胞增殖、迁移能力,采用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡情况。结果成功建立稳定转染的CANT1干扰细胞系。免疫组化显示CANT1在癌周正常肾组织中仅表达于远曲小管,近曲小管无或者仅有少量表达,而在肾透明细胞癌组织中,CANT1呈弥漫高表达状态。CANT1干扰组细胞较对照组细胞增殖明显减慢(P<0.01),迁移能力明显减弱(P<0.05),干扰组细胞周期阻滞于S期,细胞凋亡增多(P<0.05)。结论 CANT1敲低能明显抑制肾透明细胞癌769-P细胞系的增殖和迁移,使细胞周期阻滞于S期,凋亡细胞明显增多。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 第三军医大学