摘要

目的:探讨弱激光疗法(LLLT)联合人脐带间充质干细胞(h UCMSCs)定向神经分化的光学参数,为弱激光临床治疗和推广提供理论依据。方法:实验组分为对照组、单纯LLLT组、LLLT联合正常脑脊液组、LLLT联合非正常脑脊液组,其中激光采用635nm、808 nm两种波长、能量密度分为3、6、9 J/cm2,连续处理3 d;MTT法检测细胞增殖活性;免疫荧光染色定性分析神经细胞标志物nestin、neu N蛋白;倒置显微镜观察细胞形态学变化。结果:相比对照组,635 nm激光下细胞活性增强,其中,3 J/cm2剂量下的增殖速度最快,且单纯LLLT组、LLLT联合正常脑脊液组和LLLT联合非正常脑脊液组差异不明显;808 nm激光下的细胞活性低于635 nm激光,且9 J/cm2剂量下细胞增殖明显受抑制;635 nm、808 nm波长下,6 J/cm2剂量的OD值相近;免疫荧光染色下,LLLT联合正常脑脊液组的神经标志物nestin、neu N蛋白呈高阳性表达;6 J/cm2剂量的808 nm激光作用下,LLLT联合正常脑脊液组向神经细胞分化明显;635 nm激光联合正常脑脊液组的细胞密度大,但细胞形态变化不明显。结论:3 J/cm2剂量下的635 nm激光可以促进细胞增殖;正常脑脊液可以作为人脐带间充质干细胞向神经细胞定向分化的诱导剂;6 J/cm2剂量下的808 nm激光联合正常脑脊液可以有效提高人脐带间充质干细胞向神经细胞的定向分化。