人HoxA10基因真核表达载体构建和表达产物的鉴定

作者：胡双纲; 姚广新; 赵晓明; 孙赟; 高玉平

来源：生殖与避孕, 2013, (06): 383-386+401.

• HoxA10基因
• 真核表达载体
• 293T细胞
• HA标签
• 基因表达 HoxA10 gene
• eukaryotic expression vector
• 293T cell line
• HA tag
• gene expression

目的:克隆人子宫内膜容受性标志分子HoxA10基因的cDNA,转入真核细胞载体,并在293T细胞中进行表达和鉴定。方法:应用RT-PCR法从人子宫内膜组织中扩增HoxA10基因的cDNA编码区序列,将PCR产物克隆至pCMV-HA真核表达载体中,测序鉴定该载体。以LipofectamineTM2000将该载体转染入293T细胞中,Western blotting检测HoxA10蛋白的表达。结果:PCR扩增出的人HoxA10基因cDNA正确克隆到了pCMV-HA载体,成功构建了pCMV-HA-HoxA10重组载体;将其转染入293T细胞,用HoxA10和HA抗体进行Western blottin...

• 单位
  上海交通大学医学院附属仁济医院; 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所; 分子生物学国家重点实验室