地参多糖对非小细胞肺癌A549细胞抗肿瘤作用及机制

作者：程婷婷; 李岩; 陈贵元^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2022, 28(03): 83-90.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220221

• 地参多糖
• 非小细胞肺癌
• 细胞增殖
• 凋亡
• 细胞周期

目的:观察地参多糖(LLP)的体外抗肿瘤活性及机制。方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测LLP(0,5,10,15,20 g·L-1)对A549细胞不同作用时间(24,48,72 h)的增殖抑制作用;采用细胞划痕,transwell实验检测LLP(10,20 g·L-1)作用24,48 h后A549细胞的迁移侵袭能力;碘化丙啶(PI)单染法检测LLP(10,20 g·L-1)对A549细胞周期的影响;异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/PI凋亡试剂盒检测LLP(10,20 g·L-1)诱导A549细胞的凋亡作用;实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)检测LLP(10,20 g·L-1)对A549细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3),半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-8(Caspase-8),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9),细胞周期依赖性激酶-1(CDK-1),细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)mRNA表达的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测LLP对A549细胞中Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9,B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),CDK-1,细胞周期依赖性激酶4(CDK-4),细胞周期依赖性激酶-6(CDK-6),Cyclin B1,细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表达的影响。结果:与空白组比较,LLP组A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力均降低(P<0.05,P<0.01);DNA合成准备期/DNA合成前期(G0/G1期)比例升高(P<0.05);凋亡率升高(P<0.05,P<0.01);Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9mRNA表达水平升高(P<0.05,P<0.01),CDK-1,Cyclin B1mRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01);Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9,Bax蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01),Bcl-2,CDK-1,CDK-4,CDK-6,Cyclin B1,Cyclin D1蛋白表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论:LLP可抑制A549细胞的增殖,使其周期阻滞在G0/G1期,同时可能包含DNA合成后期/DNA分裂期(G2/M期),并通过线粒体凋亡途径和死亡受体途径诱导细胞凋亡。

• 单位
  大理大学; 基础医学院