茶尺蠖普通气味结合蛋白EoblGOBP2与茶树挥发物的结合功能研究

作者：赵磊; 崔宏春; **雅; 陈玲; 余继忠; 李红亮

来源：茶叶科学, 2014, 34(02): 165-171.

DOI：10.13305/j.cnki.jts.2014.02.010

• 茶尺蠖
• 普通气味结合蛋白(GOBP)
• 原核表达
• 纯化
• 茶树挥发物
• 结合特性

茶尺蠖是茶园中一种重要的鳞翅目害虫,主要以幼虫取食危害茶树叶片,给茶叶生产带来了严重威胁。茶尺蠖在寻找配偶、产卵地以及觅食活动中其嗅觉系统发挥了非常重要的作用。本研究以茶尺蠖Ectropis obliqua Prout嗅觉系统中的一个普通气味结合蛋白——EoblGOBP2为研究对象,在克隆得到的EoblGOBP2基因基础上,通过对EoblGOBP2进行原核表达、分离纯化后,利用1-NPN的荧光竞争结合法研究了体外重组EoblGOBP2与茶树挥发物的结合生理功能。Scatchard方程显示EoblGOBP2与1-NPN的解离常数KD为2.310μmol·L-1。在荧光竞争结合实验中,7种待测配基均能使1-NPN的相对荧光强度降低到50%以下,表明与EoblGOBP2均有较强的结合能力,而其中邻苯二甲酸二丁酯结合能力最强,KD值达到4.353μmol·L-1。本研究7种配基均为茶树叶片挥发物,表明EoblGOBP2在茶尺蠖嗅觉系统对茶树挥发物的信息识别结合功能中发挥了重要作用。

• 单位
  杭州市农业科学研究院; 中国农业科学院植物保护研究所; 中国计量大学; 植物病虫害生物学国家重点实验室; 生命科学学院