利用酵母双杂交筛选木薯果胶甲酯酶抑制因子MePMEI1的互作蛋白

作者：仇婷婷; 李瑞梅; 周杨骄; 林雪君; 姚远; 刘姣; 符少萍; 胡新文^*; 郭建春^*

来源：基因组学与应用生物学, 2021, 40(04): 1626-1633.

DOI：10.13417/j.gab.040.001626

• 木薯
• 果胶甲酯酶抑制因子
• 酵母双杂交
• 电压依赖性阴离子通道蛋白

果胶甲酯酶抑制因子(PMEI)在植物抗逆过程中具有重要作用。为了探究木薯MePMEI1的生物学功能及其在蛋白互作网络中的作用,本研究通过构建诱饵载体pGBKT7-MePMEI1,通过酵母双杂交方法从木薯cDNA文库中筛选Me PMEI1的互作蛋白。结果表明,酵母双杂交共筛选出57个阳性克隆,阳性率约为32.6%,测序鉴定出37种含完整开放阅读框(ORF)的候选互作蛋白,包括非特异性丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶/苏氨酸特异性蛋白激酶、叶绿素a/b结合蛋白、电压依赖性阴离子通道蛋白(VDAC2)、乙二醛酶Glyoxalase-2、氮素调节蛋白、木糖葡萄糖转移酶(TCH4)等,并通过回转验证检验其蛋白互作的真实性。验证结果表明Me PMEI1与VDAC2、Glyoxalase-2蛋白具有相互作用。这进一步补充了其蛋白互作网络,为探究MePMEI1蛋白的互作网络提供新的依据。

• 单位
  中国热带农业科学院热带生物技术研究所; 海南大学; 农业部