PGK1和ENO1介导的有氧糖酵解在脑胶质瘤血管生成中的作用

作者：王清湲; 卢金靖; 许鑫; 薛一雪; 刘丽波^*

来源：解剖科学进展, 2019, 25(04): 405-413.

DOI：10.16695/j.cnki.1006-2947.2019.04.015

• PGK1
• ENO1
• 有氧糖酵解
• 血管生成
• 胶质瘤

目的研究磷酸甘油酸激酶1 (phosphoglycerate kinase 1, PGK1)和α-烯醇化酶(α-Enolase,ENO1)在脑胶质瘤微血管内皮细胞(Glioma microvascular endothelial cells, GECs)的表达,以及介导的有氧糖酵解在脑胶质瘤血管生成中的作用。方法培养正常人脑为血管内皮细胞(normal microvascular endothelial cells, NECs)和GECs,应用Real-time PCR和Western Blot方法检测PGK1和ENO1的表达水平;设计并构建PGK1和ENO1表达沉默的质粒以及相应的对照质粒,分别转染hCMEC/D3细胞,筛选出稳定表达细胞株后建立PGK1和ENO1表达沉默的GECs;应用葡萄糖检测试剂盒检测细胞的葡萄糖摄取量,无血清培养法检测乳酸产量,Seahorse XF24细胞能量代谢分析仪检测细胞的细胞外酸化率;应用CCK8实验检测细胞增殖能力变化,Transwell实验检测细胞迁移变化,Matrigel基质胶实验检测血管形成能力的变化。结果与NECs相比,PGK1和ENO1mRNA和蛋白表达水平在GECs中显著增高;PGK1和ENO1表达沉默均显著抑制了GECs的葡萄糖摄取量、乳酸产量和细胞外酸化率,显著降低了GECs的增殖、迁移和血管形成能力。结论 PGK1和ENO1介导的有氧糖酵解促进脑胶质瘤微血管内皮细胞增殖、迁移和血管生成。

• 单位
  中国医科大学; 生命科学学院