一种重组口蹄疫疫苗的原核表达、纯化及其活性检测

作者：董博翰; 王华; 胡小平; 房明丽; 张永胜; 张培因; 王丽颖

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2009, 25(02): 123-125.

DOI：10.3321/j.issn:1007-8738.2009.02.009

• 口蹄疫疫苗
• 重组蛋白
• 纯化
• 活性检测

目的:利用原核表达系统诱导表达一种可以作为口蹄疫疫苗的重组蛋白J11-G,并对这种蛋白进行纯化以及活性检测。方法:对已经构建的表达载体PET28a-J11-G进行酶切鉴定,将鉴定后的重组载体PET28a-J11-G转化入大肠杆菌BL21,在BL21细菌细胞中诱导表达目的蛋白,用改良的镍亲和层析法纯化目的蛋白,以ELISA检测纯化所得蛋白的活性。结果:长期冻存的重组载体PET28a-J11-G结构完整,其在大肠杆菌BL21中经1mmol/LIPTG诱导后表达出相对分子质量(Mr)约为47000的目的蛋白,经纯化后获得了产率和纯度均很高的重组蛋白J11-G,ELISA检测证明该蛋白活性良好。结论:成功地对重组蛋白J11-G进行了诱导表达,改良法有利于蛋白产率和纯度的提高,纯化蛋白具有较好的免疫活性。重组蛋白J11-G将可能成为一种抗口蹄疫疫苗。

• 单位
  吉林大学白求恩医学院