施马伦贝格病毒N蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备

作者：孔玉方; 陈冬杰; 魏方; 王慧煜; 吴绍强^*

来源：中国兽医科学, 2021, 51(08): 1029-1034.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0146

• 施马伦贝格病毒
• N蛋白
• 表达
• 单克隆抗体

为了制备针对施马伦贝格病毒(SBV)N蛋白的单克隆抗体,将SBV N基因克隆至原核表达载体pET-28a,构建重组质粒pET28a-SBV-N,转化至BL21(DE3)后进行原核表达并纯化。以纯化的重组SBV-N蛋白免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体(McAbs),最终获得了3株McAbs,依次命名为2D6、4F10和4G8。Ig亚类鉴定结果显示:2D6为Ig G2b亚型,轻链为κ型;4F10为Ig M亚型,轻链为κ型;4G8为Ig M亚型,轻链为λ型。Western-blot结果显示,这3株McAbs均可与重组SBV-N和赤羽病病毒(AKAV)N蛋白产生特异性反应,进一步表明这些McAbs具有通用性。IFA结果表明,McAb 2D6有望用于SBV与AKAV的血清学鉴别诊断。SBV N蛋白和单克隆抗体的成功制备,为施马伦贝格病血清学诊断提供了生物原料。

• 单位
  中国检验检疫科学研究院