摘要
目的:探讨siRNA靶向抑制Nox2在阿霉素致人皮肤成纤维细胞损伤中的作用及机制。方法:构建阿霉素致人皮肤成纤维细胞损伤模型,检测阿霉素处理的细胞中Nox2蛋白质的表达。根据实验设计分为正常组、单纯siRNA-Nox2转染组、阿霉素模型组及siRNA-Nox2转染+阿霉素处理组。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)试剂盒检测细胞氧化应激水平。Western blotting法检测siRNA靶向抑制Nox2对阿霉素诱导的细胞凋亡的影响。结果:Western blotting结果表明,与正常组相比,阿霉素模型组细胞Nox2蛋白质水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。MMT法检测结果提示,相较于阿霉素模型组,siRNA-Nox2转染可提高细胞增殖能力和存活率,差异有统计学意义(P<0.05)。与阿霉素模型组相比,siRNA转染+阿霉素组细胞MDA和ROS水平降低,SOD活性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting结果表明,siRNA-Nox2转染可显著降低阿霉素诱导的细胞凋亡,差异有统计学意义(P <0.05)。结论:siRNA靶向抑制Nox2保护阿霉素诱导的人皮肤成纤维细胞损伤,其机制与降低胞内氧化应激和ROS水平有关。
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