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摘要
以黄鳝（Monopterus albus）肝脏cDNA为模板，利用RACE-PCR扩增了黄鳝转铁蛋白Tf基因5’和3’ cDNA末端，构建了Tf基因N端原核表达载体；转化大肠杆菌（Escherichia coli）BL21（DE3），异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导后经过Ni-NTA His·Bind Resin亲和柱分离纯化获得Tf-N蛋白；利用琼脂糖扩散抑菌圈法验证Tf-N蛋白的抑菌作用；分析了Tf-N蛋白对黄鳝肠道假单胞杆菌（Pseudomonas spp.）铁获取作用的影响。结果显示：成功克隆了黄鳝Tf基因全长，构建了pET28a/Tf-N重组表达载体，获得了纯化的Tf-N蛋白；Tf-N蛋白可抑制假单胞杆菌的生长，能与假单胞菌来源的Bfr蛋白一起共同促进假单胞杆菌的生长。该研究结果为进一步探索鱼类Tf基因的功能提供了参考。
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单位生命科学学院; 长江大学
