丝切蛋白在神经母细胞瘤中的表达及意义

作者:玉苏甫·阿克木; 和军; 阿布都赛米·阿布都热; 李水学; 克力木·阿不都热依木*
来源:中华小儿外科杂志, 2022, 43(06): 489-494.

摘要

目的探讨丝切蛋白(cofilin, CFL)在神经母细胞瘤中的表达变化与意义。方法收集2017年1月至2019年1月在新疆维吾尔自治区人民医院及新疆维吾尔自治区儿童医院进行手术治疗的神经母细胞瘤患儿的肿瘤组织和癌旁组织各10例, 将最终符合实验标准的12例组织分为两组, 其中6例肿瘤组织作为肿瘤组织组, 6例癌旁组织作为癌旁组织组, 通过实时定量聚合酶链反应(quanti-ficational real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)和蛋白质印迹法检测两组CFL、Bax、Bcl-2、MCL-1的表达水平。将CFL siRNA转染至SK-N-SH细胞内, 采用CCK-8法检测细胞生长情况, 采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期的差异变化。结果 CFL mRNA和蛋白在肿瘤组织组中的表达水平较癌旁组织组显著升高, 分别为(2.53±1.01)比(1.12±0.47)、(0.74±0.19)比(0.48± 0.15 ), 差异均具有统计学意义(P<0.05);Bax mRNA和蛋白在肿瘤组织组中的表达水平较癌旁组织组显著降低, 分别为(0.81±0.22)比(1.37±0.26)、(0.38±0.03)比(0.53±0.06), 差异均具有统计学意义(P<0.05);Bcl-2、MCL-1的mRNA、蛋白在肿瘤组织组中的表达水平较癌旁组织组显著升高, 其中Bcl-2 mRNA、蛋白水平分别为(2.98±0.57)比(1.67±0.55)、(0.54±0.09)比(0.37± 0.10);MCL-1 mRNA、蛋白水平分别为(4.48±1.26)比(1.61±0.62)、(0.51±0.08)比(0.33± 0.08 ), 差异均具有统计学意义(P<0.05)。CFL siRNA转染的SK-N-SH细胞增殖活性为78%, 较CFL siRNA-NC SK-N-SH和SK-N-SH降低了22%, 而凋亡率为18.61%显著高于CFL siRNA-NC SK-N-SH的4.99%和SK-N-SH的4.79%, 差异具有统计学意义(P<0.05)。在G1期, CFL siRNA SK-N-SH细胞占比为63%, CFL siRNA-NC SK-N-SH和SK-N-SH的分别为50%和49%, 差异具有统计学意义(P<0.05 );在G2期与S期, CFL siRNA SK-N-SH细胞占比分别为25%、12%, CFL siRNA-NC SK-N-SH和SK-N-SH细胞占比均为34%、16%, 差异均具有统计学意义(P<0.05 )。结论 CFL在神经母细胞瘤组织中高表达, 下调CFL可以抑制神经母细胞株SK-N-SH的增殖, 促进细胞凋亡, 调节细胞周期。这为神经母细胞瘤的诊断和未来的靶向治疗提供了新的思路和方向。