携带GFP基因逆转录病毒感染原代培养脐带基质间充质细胞

作者：艾民; 张清华; 蒋知新; 沙杭; 高毅; 卢海

来源：山东医药, 2011, 51(21): 16-17.

DOI：10.3969/j.issn.1002-266X.2011.21.006

• 逆转录病毒
• 脐带
• 基质间充质细胞
• 重编程
• 诱导多潜能干细胞 retrovirus
• umbilical cord
• mesenchymal stem cells
• reprogramming
• induced pluripotent stem cells

目的应用携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的逆转录病毒感染原代培养脐带基质间充质细胞,为细胞重编程实验提供有效基因转移载体。方法利用酶消化法在体外分离培养脐带基质间充质细胞。应用磷酸钙法将GFP基因转染到293T细胞内,包装生产携带GFP基因的逆转录病毒。收集病毒上清液感染脐带基质间充质细胞,应用倒置荧光显微镜观察逆转录病毒感染脐带基质间充质细胞情况。结果体外分离培养出脐带基质间充质细胞;293T细胞包装生产携带GFP基因逆转录病毒;包装生产后的逆转录病毒成功地感染脐带基质间充质细胞。结论逆转录病毒可作为有效载体将外源性基因转染入脐带基质间充质细胞内,并且细胞能够稳定表达被导入的外源性基因。

• 单位
  南方医科大学; 焦作市第二人民医院