牛病毒性腹泻病毒2型E2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

作者：武沛泽; 胡义彬; 孟文文; 武春霞; 马岩; 张巨峰; 郭宇; 李运娜; 徐晓静^*; 赵卓^*

来源：兽医导刊, 2022, (02): 25-33.

• 牛病毒性腹泻病毒2型
• E2蛋白
• 杂交瘤
• 单克隆抗体

为制备牛病毒性腹泻病毒2型(BVDV2)E2蛋白的单克隆抗体,采用表达的E2蛋白免疫BALB/c小鼠,4次免疫后分离小鼠脾细胞并将其与SP2/0细胞融合,通过间接ELISA方法筛选,获得5株能稳定分泌抗BVDV2 E2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。Western blot和IFA结果显示,其中1株为BVDV2特异性单克隆抗体,其细胞上清ELISA抗体效价达59049。亚型鉴定结果显示,单克隆抗体属于Ig G1,轻链为κ型。经腹水制备和纯化后,其纯度达85%以上,间接ELISA抗体效价达128000以上,经连续传代20代仍能稳定分泌单克隆抗体。通过杂交瘤融合后筛选出1株针对BVDV2 E2蛋白的单克隆细胞株,为开展免疫学研究和2型牛病毒性腹泻/黏膜病诊断检测方法的建立奠定了基础。

• 单位
  内蒙古自治区动物疫病预防控制中心; 内蒙古农业大学