寡核苷酸阵列芯片快速鉴定大肠杆菌O_(157):H_7初步研究

作者：史智扬; 刘和平; 汪华; 郭喜玲; 顾玲; 曾晓燕; 何农跃; 陆祖宏

来源：中国热带医学, 2006, (12): 2117-2119+2126.

• 大肠杆菌
• O157:H7
• 毒力因子
• 多重PCR
• 寡核苷酸阵列芯片 Escherichia coli
• O_(157):H_7
• Virulence factor
• Multiplex PCR
• Oligonucleotide arrays chip

目的设计、制作一种微型化寡核苷酸阵列芯片,评价快速鉴定肠出血性大肠杆菌O157:H7的效果。方法多重PCR扩增大肠杆菌O157:H7七个特异性基因位点(rfbEf、licH7i、ntimin、Shiga-like toxins I and II、hemolysin A和uidA),通过PCR反应掺入SpectrumOrangTM-dUTP获取荧光标记的靶序列,与制备的芯片寡核苷酸探针杂交。结果寡核苷酸阵列芯片检测结果与试验预期相符,获取的杂交图分辨效果明显优于多重PCR琼脂糖凝胶电泳。结论基于玻片的寡核苷酸阵列芯片制作简便,鉴定病原菌检测细菌毒力因子快速、灵敏、特异,有良好的应用前景。

• 单位
  生物电子学国家重点实验室; 东南大学; 江苏省疾病预防控制中心