摘要
本研究首先利用Red同源重组系统对肠毒性大肠杆菌H10407/Δhns进行stp A基因敲除并进行验证。随后在模拟肠内缺氧环境条件下,研究H10407/Δhns单基因敲除和H10407/Δhns/Δstp A双基因敲除对肠毒性大肠杆菌LT毒素表达的调控影响,并利用hns基因表达载体进行功能回补实验。结果发现,Red重组系统能够高效的完成肠毒性大肠杆菌hns和stp A基因敲除;在体外有氧条件下hns基因敲除有效促进了LT毒素的表达;而在缺氧条件下,hns和stp A双敲除有效促进了LT毒素的表达,但H-NS功能回补的hns单敲除株不能有效抑制LT毒素的表达。结果表明H-NS与Stp A对LT毒素表达调控具有重要作用,而且有氧与缺氧环境中发挥作用存在差异。
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单位第四军医大学; 唐都医院