几种定量线粒体DNA1555A>G异质性突变检测方法

作者：高慧; 沈姗姗; 刘晶晶; 王琳凯; 梁少明; 张阮章; 胡玉华; 郭辉; 林玉梅; 王沙燕

来源：中华耳科学杂志, 2016, 14(05): 686-691.

DOI：10.3969/j.issn.1672-2922.2016.05.026

• 线粒体DNA 1555A>G
• 耳聋
• TaqMan探针
• 熔解曲线
• 变性高效液相色谱分析技术

目的利用Taq Man探针建立熔解曲线定量分析技术平台,比较Taq Man探针熔解曲线技术、变性高效液相色谱技术(DHPLC)及测序技术在检测线粒体DNA 1555A>G异质性突变负荷方面的差异。方法建立Taq Man探针熔解曲线技术,分析氨基糖苷类药物性耳聋家系及正常人群的线粒体DNA 1555A>G异质性突变水平,并与前期实验中DHPLC技术及测序技术的检测结果进行对比分析。结果 Taq Man探针熔解曲线技术成功分析50例样本的线粒体DNA 1555A>G突变水平,相比于Sanger测序技术多发现1例异质性突变,但比DHPLC技术少发现3例异质性突变。结论本实验建立的Taq Man探针熔解曲线技术成功检出19%至86%范围内的线粒体DNA 1555A>G异质性突变水平,操作简单,成本低。

• 单位
  暨南大学; 第二临床医学院; 亚能生物技术（深圳）有限公司; 深圳市人民医院