可溶性尿酸对肠上皮细胞的影响及其机制

作者：杨婉; 吕秋兰; 徐大星; 刘秀; 王鹏君; 邢士超^*

来源：青岛大学学报(医学版), 2022, 58(01): 13-18.

• 肠细胞
• 高尿酸血症
• 尿酸
• 紧密连接蛋白质类

目的 探讨可溶性尿酸(sUA)对肠上皮细胞的影响及其机制。方法 将大鼠肠上皮细胞(IEC-6细胞)随机分为对照组和实验组，对照组采用0 mg/L sUA刺激IEC-6细胞；实验组分别用25、50、100、200、400 mg/L浓度的sUA刺激IEC-6细胞，观察sUA对细胞活力的影响，并筛选出对IEC-6细胞毒性较小的sUA浓度。采用蛋白印迹法和实时荧光定量PCR,检测sUA刺激对IEC-6细胞蛋白激酶C(PKC)、肿瘤坏死因子α(TNFα)表达的影响；采用PKC抑制剂抑制PKC的表达，观察PKC降低对炎症因子表达的影响。采用活性氧检测试剂盒检测sUA对IEC-6细胞线粒体活性氧(ROS)的影响，线粒体膜电位试剂盒检测IEC-6细胞膜电位变化，免疫荧光方法检测IEC-6细胞紧密连接蛋白(ZO-1)表达。结果 25、50、100 mg/L浓度sUA刺激组细胞活力与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);200、400 mg/L浓度sUA刺激组细胞活力受损较为显著，差异有统计学意义(F=20.519,P<0.05)。25、50、100 mg/L浓度sUA刺激组IEC-6细胞PKC、TNFα mRNA和蛋白表达高于对照组，差异有统计学意义(F=36.750～81.660,P<0.05)。PKC抑制剂组PKC、TNFα蛋白表达显著低于对照组，差异有统计学意义(t=16.646、22.572,P<0.05)。25、50、100 mg/L浓度sUA刺激组ROS较对照组增多(F=341.708,P<0.05)。50、100mg/L浓度sUA刺激组线粒体膜电位较对照组明显降低，差异有统计学意义(F=400.952,P<0.05)。100 mg/L浓度sUA刺激组ZO-1蛋白表达较对照组降低，差异有统计学意义(t=50.508,P<0.05)。结论sUA能激活由PKC介导的免疫应答，产生过量的ROS,释放炎症因子，引起肠上皮细胞炎症反应。

• 单位
  青岛大学; 基础医学院; 青岛大学附属医院