基于FXR-SULT1E1通路探究盐补骨脂致小鼠胆汁淤积性肝损伤的性别差异

作者：吴育; 周浓; 梅春梅; 石芸; 华政颖; 李伟东^*

来源：中草药, 2023, 54(09): 2802-2811.

• 盐补骨脂
• 法尼醇受体-硫酸基转移酶1E1通路
• 肝细胞核因子4α
• 胆汁淤积性肝损伤
• 雌激素
• 性别差异

目的 从法尼醇受体(farnesoid X receptor,FXR)-硫酸基转移酶1E1(sulfotransferase 1E1,SULT1E1)通路探讨盐补骨脂致小鼠胆汁淤积性肝损伤性别差异的潜在机制。方法 ICR雌性和雄性小鼠连续ig不同剂量(5、10、20 g/kg)的盐补骨脂水煎液30 d，采用HPLC仪检测补骨脂炮制后化学成分含量；采用全自动生化仪检测肝损伤相关指标；取肝脏、脾脏、肾脏、肺脏以及卵巢、睾丸，称定质量并计算脏器指数；采用苏木素-伊红(HE)染色法进行肝脏病理组织学检查；采用透射电镜观察盐补骨脂致胆汁淤积性肝损伤的显微结构变化；采用ELISA法检测血清中雌二醇(estradiol,E2)、促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、对氧磷酶1(paraoxonase 1,PON1)及FXR含量；采用免疫荧光染色法检测肝脏胆盐输出泵(bile salt export pump,Bsep)、多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance protein 2,Mrp2)和SULT1E1的表达；采用Western blotting检测肝脏FXR、Mrp2、胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7a1)、Bsep、SULT1E1、肝细胞核因子4α(hepatocyte nuclear factor 4α,HNF4α)和核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)蛋白表达。结果 盐补骨脂给药后小鼠肝脏出现明显的肝细胞肿胀、胆管扩张、血清生化指标升高等病理变化，其中雌鼠更为严重(P<0.05、0.01、0.001)。免疫荧光实验显示给药后肝脏Bsep和Mrp2荧光强度均显著降低(P<0.05、0.001)，但雌鼠更为明显；雌鼠肝脏中SULT1E1表达水平显著降低(P<0.001)，而在雄鼠的肝脏中没有差异。ELISA结果显示雌鼠和雄鼠血清中E2、FSH和LH水平均显著升高(P<0.05、0.01、0.001)，雌鼠更为明显。Western blotting结果显示，雌鼠给药后肝脏FXR、Mrp2、Bsep、SULT1E1、HNF4α和Nrf2表达明显降低(P<0.05、0.01、0.001),CYP7a1表达显著升高(P<0.01)；雄鼠给药后FXR和Bsep表达明显降低(P<0.05、0.01)。结论 盐补骨脂通过HNF4α调控FXR-SULT1E1信号通路，补骨脂下调了胆固醇和胆汁酸生物合成的关键酶SULT1E1，增加了胆汁淤积性肝损伤的风险，这可能是肝损伤性别差异的主要原因。

• 单位
  重庆三峡学院; 南京中医药大学