稳定表达GlyRα1的HEK293细胞系的建立

作者:蒋玲琳; 刘丽; 朱含章; 杨青; 范乐明; 陈琪
来源:南京医科大学学报(自然科学版), 2007, 27(07): 647-650.
DOI:10.3969/j.issn.1007-4368.2007.07.001

摘要

目的:建立稳定表达甘氨酸受体α1亚基(GlyRα1)真核表达载体的人胚肾细胞(HEK293)细胞系。方法:构建pcDNA3.1-GlyRα1真核表达载体,应用脂质体介导的转染技术将该质粒导入HEK293细胞,再用G418筛选表达稳定的细胞系。真核细胞中GlyRα1的表达分别用RT-PCR与Western blot方法检测。结果:在7株转染并经G418反复筛选的HEK293细胞系中,有4株细胞系明显表达GlyRα1的mRNA及其蛋白质,其余3株细胞表达较弱或者没有表达。结论:用pcDNA3.1-GlyRα1转染的HEK293细胞经G418筛选,可成功建立GlyRα1稳定表达系。

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