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摘要
目的 构建硒代半胱氨酸插入序列结合蛋白2(SBP2)突变型转基因小鼠模型，并分析其甲状腺表型。方法 利用同源重组工程技术建立Sbp2基因突变敲入打靶载体，Southern blot筛选阳性胚胎干细胞克隆，利用显微注射法制备嵌合体小鼠，经育种后获得F3代小鼠。采用充足硒饲料和低硒饲料喂养F3代小鼠60 d,喂养30 d及60 d时采用放射性免疫法测定其甲状腺功能。结果 Sbp2 R129X和R775X突变敲入打靶载体电转入胚胎干细胞后分别获得12个和23个阳性克隆，经Southern blot筛选后通过显微注射法分别获得36只Sbp2 R129X和27只Sbp2 R775X嵌合体雄鼠，育种结果显示纯合突变和复合杂合突变的F3代小鼠均在胚胎期死亡。充足硒饲料喂养下Sbp2 R129X和R775X杂合突变小鼠的甲状腺功能与野生型小鼠相比差异无统计学意义，而低硒饲料喂养下R775X杂合突变雌鼠的血清T4、雄鼠的血清rT3,以及雌鼠和雄鼠的T4/T3比值均显著增高(P<0.05)。结论 成功建立了Sbp2 R129X和R775X基因突变敲入小鼠模型，低硒诱导下R775X杂合突变小鼠可模拟SBP2缺陷患者的甲状腺表型。
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单位西安交通大学第一附属医院; 中国药科大学
