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摘要
目的探讨活化态肝星状细胞(a HSC)促进肝癌血管新生的机制。方法 a HSC分别连续培养1、3、5、7 d后收集细胞,实时荧光定量PCR检测a HSC血管生成素-1(Ang-1)m RNA相对表达量。免疫荧光染色法观察a HSC的Ang-1蛋白表达情况。Transwell小室观察a HSC对肝血管内皮细胞(HVEC)增殖的影响。小管形成实验观察a HSC对HVEC成管作用的影响。实验数据比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果 a HSC培养1、3、5、7 d,其Ang-1 m RNA的相对表达量分别为1.000±0.024、1.920±0.080、6.230±0.320、7.820±0.380,随培养时间的延长逐渐增加(LSD-t=7.32,13.68,8.34;P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,Ang-1与平滑肌肌动蛋白抗体(a SMA)共同表达于a HSC。Transwell小室间接共培养结果显示,a HSC促进HVEC的增殖,加入Ang-1抗体后,a HSC促进HVEC增殖的能力减弱。小管形成实验结果显示,在a HSC条件培养基的作用下,HVEC可以聚合并逐渐形成管状结构,而加入Ang-1抗体后,微血管形成明显减少。结论 a HSC可能通过分泌Ang-1促进肝癌中HVEC的增殖及血管生成。
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