rTNSALP-FcD10重组表达质粒的构建及在CHO-K1细胞的稳定表达

作者：徐颖; 付加芳; 唐超; 韩金祥; 王世立

来源：中国生物制品学杂志, 2019, (05): 521-526.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.002608

• 重组人非组织特异碱性磷酸酶
• CHO-K1细胞
• 转染
• 稳定表达 Recombinant human tissue-nonspecific alkaline phosphatase
• CHO-K1 cells
• Transfection
• Stable expression

目的构建重组表达质粒pcDNA3. 1-rTNSALP-FcD10及p EF1-rTNSALP-FcD10,获得能够稳定表达rTNSALP-FcD10蛋白的CHO-K1细胞株。方法去除重组人非组织特异碱性磷酸酶(tissue-nonspecific alkaline phosphatase,TNSALP)多钛链C端氨基酸连接IgG1的Fc片段及10个天冬氨酸,构建目的基因rhALP-FcD10,将基因分别克隆至pcDNA3. 1及p EF1/Myc-His B载体上,均转化E. coli DH5α细胞;将签定正确的两组重组质粒均转染CHO-K1细胞,进行G418压力筛选,建立稳定转染的CHO-...

• 单位
  济南大学; 山东省医学科学院; 生命科学学院