2-氨基乙氧基二苯基硼酸对乙酰胆碱诱导的急性分离小鼠胰腺腺泡细胞Ca2+信号的机制

作者：夏坤锟^*; 郭文治; 袁维堂; 吴杰; 张水军

来源：中华实验外科杂志, 2018, 35(07): 1271-1273.

• 2-氨基乙氧基二苯基硼酸盐
• 钙信号
• 胰腺腺泡细胞
• 膜片钳

目的探讨2-氨基乙氧基二苯基硼酸盐(2APB)增强细胞内Ca2+振荡的机制。方法在急性分离的小鼠胰腺腺泡细胞中,使用Ca2+敏感染料(fluo-4)成像技术,直接监测细胞内Ca2+信号。使用膜片钳全细胞记录技术,检查2APB对乙酰胆碱(ACh)诱导的Ca2+振荡的作用特征和机制。结果 (1)2APB浓度依赖性的增强了ACh诱导的Ca2+振荡,随着2APB浓度增高(1～100μmol/L),Ca2+振荡幅度及宽度增大。(2)2APB增强ACh诱导的Ca2+振荡也受到ACh浓度的影响。在100μmol/L 2APB的条件下,当ACh低于5 nmol/L时,通常没有作用;在ACh 10～30 nmol/L时,增强作用显著;而在ACh 100～1 000nmol/L时,出现抑制作用。(3)细胞内施加100μmol/L2APB对10 nmol/L ACh诱导的Ca2+振荡无影响(P=0.378,n=6),提示2APB增强ACh诱导的Ca2+振荡的作用靶点是在细胞外而不是细胞内。(4)2APB可明显阻断SOCE,能将3μmol/L TG引起Ca2+振荡的净电流(标准化后)减少至(3.0±4.8)%(P=0.000,n=6),提示SOCE可能是2APB增强Ca2+振荡的靶点。(5)SOCE阻断剂GSK可模拟2APB增强Ca2+振荡的作用(P=0.000,n=7)。(6)使用毒胡萝卜素使Ca2+池排空后,与给药前(为100%)比较,施加2APB引起Ca2+振荡的净电流(标准化后)为(93.0±9.5)%(P=0.427,n=7),即2APB增强Ca2+振荡作用被消除。结论在ACh低浓度(10～30 nmol/L)的条件下,2APB通过阻断SOCE促进Ca2+从钙池进一步排空,导致了Ca2+振荡的增强,而在高ACh浓度(>100 nmol/L)的条件下,2APB通过阻断SOCE减少钙池从胞外得到Ca2+的补充,导致了Ca2+信号减弱。

• 单位
  郑州大学第一附属医院