黄热病毒可视化RT-LAMP检测方法的建立

作者：郑夔^*; 戴俊; 刘丽娟; 袁帅; 孙芳芳; 黄吉城

来源：中国国境卫生检疫杂志, 2019, 42(03): 153-157.

DOI：10.16408/j.1004-9770.2019.03.001

• 黄热病毒
• 环介导等温扩增
• 等温扩增

目的建立一种根据颜色变化判断结果的黄热病毒可视化RT-LAMP快速核酸检测方法。方法针对112株目前GeneBank上所有基因亚型黄热病毒株的5’端非编码区保守性核苷酸序列,设计黄热病毒特异性LAMP引物,建立黄热病毒可视化RT-LAMP检测方法。评价该方法的特异性、灵敏性,并用临床样本和模拟样本进行应用性验证。结果建立的RT-LAMP方法有较高的特异性,与登革病毒、裂谷热病毒、西尼罗病毒、乙脑病毒及基孔肯雅病毒无交叉反应;用体外转录的RNA模板评估,其灵敏性可达102拷贝/μl;用口岸发热病例血清样本验证,该方法可检出血清中的黄热病毒。结论建立的黄热病毒可视化RT-LAMP检测方法操作简便、快速、特异性好,可应用于黄热病毒的现场检测。

• 单位
  中国检验检疫科学研究院; 广东检验检疫技术中心