BDNF和TERT联合转染BMSCs对血管性痴呆大鼠学习记忆功能恢复及海马CA1区超微结构的影响

作者：王菲; 常光明; 耿鑫

来源：天津医科大学学报, 2014, 20(03): 172-176.

• 血管性痴呆
• 骨髓基质干细胞
• 脑源性神经营养因子
• 端粒酶
• 突触素
• 大鼠

目的:研究脑源性神经营养因子(BDNF)和端粒酶逆转录酶(TERT)联合转染的骨髓基质干细胞(BMSCs)对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆功能恢复的作用,进一步探讨VD的有效治疗途径。方法:经大鼠股骨分离并鉴定BMSCs,构建pLXSNTERT重组子后转化至BMSCs,软琼脂克隆形成实验检测体外培养的TERT-BMSCs的成瘤性。应用Ad5-BDNF转染TERTBMSCs,构建BDNF-TERT联合转染的BMSCs。将40只雄性Wistar大鼠随机分为4组:对照组、VD组、BMSCs组、BDNFTERT-BMSCs组。采用两血管阻断法制备VD模型。采用Morris水迷宫测试方法测试各组大鼠空间学习记忆力。应用RT-PCR和Western blot方法分别检测各组大鼠海马CA1区BDNF、TrkB、SYN基因mRNA和蛋白表达情况,应用透射电镜观察各组大鼠海马CA1区超微结构变化。结果:行为学实验Morris水迷宫测试结果及超微病理透射电镜观察均显示BMSCs和BDNFTERT-BMSCs对血管性痴呆大鼠有改善作用,且BDNF-TERT-BMSCs较BMSCs的作用更为显著。荧光实时定量RT-PCR和Western blot结果显示,BMSCs组和BDNF-TERT-BMSCs组中BDNF、TrkB、SYN mRNA及蛋白表达水平均较痴呆模型组增高(P<0.05),且BDNF-TERT-BMSCs组较BMSCs组增加更为显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:BDNF-TERT联合转染BMSCs较普通的BMSCs对VD有更好的治疗效果,可明显改善VD大鼠的学习记忆功能的恢复。

• 单位
  天津医科大学; 基础医学院; 天津医科大学总医院; 神经内科