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摘要
目的 利用环介导等温扩增（LAMP）可视化检测技术，建立一种灵敏、特异和简便的恙虫病检测方法。方法 利用LAMP在线引物设计软件Primer Explorer V4，以恙虫病东方体热休克蛋白groEL基因作为靶序列，设计扩增引物，优化反应条件。利用恙虫病东方体标准株评估灵敏度和特异度；收集42份恙虫病血样，分别采用LAMP、普通PCR和实时荧光定量PCR方法进行验证。结果 建立的LAMP方法可在61～65℃80 min内完成恙虫病东方体的快速检测，最低检测限为10拷贝/μL，高于普通PCR方法 2个数量级，高于荧光定量PCR方法 1个数量级；对8种常见的自然疫源性疾病病原体检测均为阴性，特异度为100%；对42份恙虫病血样采用3种方法检测，阳性率一致，均为21.4%(9/42)。结论 本研究建立的恙虫病东方体LAMP可视化检测反应快速，操作简便，灵敏特异，可在基层医疗卫生机构运用推广。
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单位福建省疾病预防控制中心
