PM2.5对角质形成细胞增殖、凋亡及对CCL20和核转录因子-κB表达的影响

作者：李锦濯; 林志鹏; 曾倩文; 孙仁山^*

来源：实用皮肤病学杂志, 2020, 13(02): 77-80.

• PM2.5
• HaCaT细胞
• CCL20
• NF-κB

目的探讨大气颗粒物(PM2.5)对皮肤角质形成细胞的生物学效应。方法角质形成细胞株(HaCaT细胞)暴露于不同浓度PM2.5混悬液(0～400μg/ml)24 h,采用CCK-8法检测不同浓度及不同暴露时间(1～24 h)的细胞存活率;Annexin V法检测细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测不同浓度处理组细胞内细胞因子CCL20 mRNA的表达水平及CCL20分泌浓度;免疫印迹试验(Western blot)检测细胞中核转录因子(NF)-κB信号通路相关蛋白的表达水平。结果与对照组(0μg/ml)相比,当PM2.5浓度≥50μg/ml或刺激时间≥3 h时,各组细胞存活率均显著降低(P <0.05);随着PM2.5刺激浓度增高(PM2.5浓度≥50μg/ml),各组细胞凋亡率均显著增高(P <0.01),细胞中炎性因子CCL20的m RNA表达水平显著上调(P <0.05);随着PM2.5刺激浓度增高(PM2.5浓度≥25μg/ml),CCL20分泌水平显著上调(P <0.05);Western blot检测显示细胞中NF-κB信号通路关键蛋白p65的磷酸化水平表达上调。结论 PM2.5可降低角质形成细胞存活率,促进细胞凋亡,且可能通过激活NF-κB信号通路诱导角质形成细胞内细胞因子CCL20的表达上调,进而介导多种慢性皮肤炎症反应。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 大坪医院