nNOS磷酸化在大鼠神经病理性疼痛发病中的作用及其机制

作者：何庆标; 闵宇懿; 张绍杰; 莫力; 王育明

来源：南京医科大学学报(自然科学版), 2016, 36(03): 302-306.

• nNOS
• CAPON
• 磷酸化
• 神经病理性疼痛

目的:探索神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)模型大鼠脊髓内神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,n NOS)的磷酸化是否对神经病理性疼痛具有调节作用,研究n NOS磷酸化在神经病理性疼痛中的作用机制。方法 :选用雄性SPF级SD大鼠60只,随机分为4组。假手术组:只暴露脊神经,不结扎;实验组:制作SNL模型,鞘内注射钙依赖性蛋白激酶Ⅱ(phosphorylated calcium/calmodulin dependent kinaseⅡ,p-Ca MKⅡ)抑制剂KN93;阴性对照组:制作SNL模型,鞘内注射DMSO;模型组:制作SNL模型,不给药。于术前1 d、术后15 d以及鞘内给药后14 h测定机械痛阈值。采用Western blot检测腰段脊髓组织p-Ca MKⅡ、n NOS与p-n NOS的表达水平,利用免疫共沉淀以及免疫荧光实验检测n NOS与其接头蛋白CAPON是否具有相互作用。结果:SNL可导致大鼠机械疼痛阈值降低(P<0.01),脊髓组织p-Ca MKⅡ的表达增加(P<0.05),p-n NOS的表达下降(P<0.05),髓鞘内注射KN93可反转神经结扎所致的上述趋势;n NOS与其接头蛋白CAPON在大鼠体内存在相互作用,n NOS的磷酸化能降低其与CAPON的相互作用强度。结论:n NOS的磷酸化参与了SNL诱导的神经病理性疼痛的维持,p-Ca MKⅡ通过对n NOS的磷酸化,降低n NOS与其接头蛋白CAPON在体内的相互作用强度,针对n NOS的磷酸化信号途径的治疗可为神经病理性疼痛的治疗提供新的视野。

• 单位
  南方医科大学南方医院; 武警广东省总队医院