利用报道基因检测鼻咽癌细胞的RNA干扰作用

作者：尹志华; 任彩萍; 李峰; 蒋卫红; 杨旭宇; 冯湘玲; 姚开泰

来源：癌症, 2005, 24(03): 371-375.

DOI：10.3969/j.issn.1000-467X.2005.03.024

• 鼻咽肿瘤
• RNA干扰
• 绿色荧光蛋白
• 荧光素酶 Nasopharyngeal neoplasms
• RNA interference
• Green fluorescent protein
• Luciferase

背景与目的:RNA干扰(RNAinterference,RNAi)具有高效特异阻断基因表达的特点,在基因功能研究、信号转导通路的研究以及基因治疗中得到很广泛的应用。本实验通过体外转录合成siRNA和构建表达shRNA的质粒载体两种方法,检测鼻咽癌细胞系的RNAi作用,建立一个较完善的RNAi技术平台。方法:体外转录合成或通过pSUPER.retro构建表达针对GFP和荧光素酶的siRNAs或shRNAs,将它们和报道基因一起瞬时转染HeLa、CNE1、CNE2和5-8F细胞,用荧光显微镜和Westernblot检测GFP表达情况;用荧光素酶检测系统分析荧光素酶的活性。结果:3'末端带UU突出的...

• 单位
  中南大学湘雅医院; 广东医科大学; 中南大学