利用亚细胞组分蛋白分离技术有效提取细胞骨架及其相关蛋白

作者：蔡贞; 熊石龙; 周园; 籍会彩; 向春艳; 郑磊

来源：南方医科大学学报, 2013, 33(05): 698-702.

DOI：10.3969/j.issn.1673-4254.2013.05.14

• 组分蛋白提取
• 细胞骨架蛋白
• 双向凝胶电泳 subcellular proteome extraction
• cytoskeleton protein
• two-dimensional gel eletrophoresis

目的建立一种可用于后续双向电泳研究的细胞骨架及相关蛋白的提取方法。方法采用亚细胞组分蛋白分步提取方法,根据提取过程中细胞形态变化,提取后组分蛋白电泳图谱等优化提取条件。用双向凝胶电泳、免疫印迹分析、蛋白质点质谱鉴定等方法验证该提取方法的重复性和各组分蛋白提取纯度。结果各组分蛋白的双向电泳蛋白图谱差异明显,具备各自特征性的蛋白点分布,各组分标志蛋白FAK、Integrin-β1、Histone H1和cytokeratin 19分别只表达在细胞浆、细胞膜、细胞核和细胞骨架组分。细胞骨架蛋白组分中约90%以上的蛋白质点经质谱鉴定为细胞骨架及相关蛋白。结论亚细胞组分蛋白顺序提取方法具有较好的重复性,...

• 单位
  南方医科大学南方医院