一株青贮窖源丁酸梭菌的分离鉴定及其对小鼠的毒性和生长性能的影响

作者：王健; 王立超; 周昕; 黄秋连; 张嘉宾; 张爱忠; 曹阳^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2021, (18): 91-153.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.03.0388

• 青贮紫花苜蓿
• 丁酸梭菌
• 分离
• 鉴定
• 昆明小鼠
• 急性经口毒性试验
• 安全性
• 生长性能

为了对紫花苜蓿青贮窖中的丁酸梭菌进行分离鉴定,并研究其对小鼠毒性和生长性能的影响,试验从青贮紫花苜蓿中分离培养丁酸梭菌,疑似菌株经形态学、生理生化以及16S rDNA序列鉴定后,分析阳性丁酸梭菌的最适生长温度和pH值,然后进行小鼠急性经口毒性试验[将20只体重为18～22 g的SPF雄性昆明(KM)小鼠随机分为对照组和丁酸梭菌组,每组10只,丁酸梭菌组按2×1010 cfu/kg灌胃丁酸梭菌分离株稀释液,对照组灌胃等体积的生理盐水,每天9:00和15:00进行灌胃,预试期5 d,试验期10 d,试验前称重,记为初重,试验结束后颈椎脱臼法处死小鼠,称重,记为末重,取心脏、肝脏、脾脏、肾脏称重并计算各脏器系数)和其对小鼠生长性能影响试验(将120只体重为18～22 g的SPF雄性KM小鼠随机分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、商品菌组,每组6个重复,每个重复4只,对照组灌胃生理盐水,低剂量组、中剂量组、高剂量组分别按2×106,2×108,2×1010 cfu/kg灌胃丁酸梭菌分离株稀释液,商品菌组按2×108 cfu/kg灌胃商品丁酸梭菌,每天9:00和15:00灌胃,预试期5 d,试验期28 d,于试验前和试验第14,28天称重,记录每天的耗料量、腹泻数和死亡数,计算0～14 d和15～28 d的平均日增重、平均日采食量、料重比、腹泻率和死亡率)。结果表明:从青贮紫花苜蓿中成功分离一株丁酸梭菌,命名为C3菌株,其最适生长温度在35～40℃之间、pH值在7.0～8.0之间。丁酸梭菌组与对照组小鼠均未发生中毒、死亡现象,且两组小鼠的初重、末重和心脏、肝脏、脾脏、肾脏的重量以及各脏器系数均差异不显著(P>0.05)。C3菌株灌胃14 d前,各组KM小鼠之间平均日增重、平均日采食量和料重比均差异不显著(P>0.05),腹泻率和死亡率均为0;灌胃14 d后,与对照组比,低、中、高剂量组和商品菌组可显著提高KM小鼠平均日增重(P<0.05),降低平均日采食量(P<0.05或P>0.05),以及显著降低料重比(P<0.05)。说明从青贮紫花苜蓿中成功分离到一株丁酸梭菌,其具有开发成为绿色、无毒饲料添加剂的潜在可能。

• 单位
  黑龙江八一农垦大学; 动物科技学院