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摘要
背景：研究发现，内皮素参与了脊髓损伤后血脊髓屏障的破坏，干细胞来源外泌体可降低血脊髓屏障的通透性，修复脊髓损伤。目的：观察人脐带间充质干细胞来源外泌体是否可以通过抑制内皮素1表达降低血脊髓屏障的通透性，进而修复脊髓损伤。方法：用超速离心法从人脐带间充质干细胞培养上清液中提取外泌体，透射电子显微镜观察其形态，Western blot检测tsg101、CD63的表达。80只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、外泌体组、内皮素1组(n=20)，采用改良Allen’s法制备大鼠脊髓损伤模型，内皮素1组用微量注射器直接向损伤部位注射10μL(1μg/mL)内皮素1，术后即刻及1,2 d，分别给予假手术组、模型组尾静脉注射200μL PBS，外泌体组、内皮素1组尾静脉注射200μL外泌体(200μg/mL)。脊髓损伤后第1,3,7,14,21天进行后肢运功功能评分；损伤后第7天通过伊文思蓝染色观察血脊髓屏障通透性，Western blot检测脊髓组织中紧密连接蛋白ZO-1、β-Catenin、Occludin和内皮素1的表达。结果与结论：(1)外泌体组BBB评分在损伤后3-21 d显著高于模型组(P <0.05)，苏木精-伊红染色显示外泌体组脊髓损伤较模型组明显减轻；内皮素1组BBB评分较外泌体组显著降低(P <0.05)，内皮素1组脊髓损伤较外泌体组加重；(2)模型组内皮素1表达量较假手术组显著增加(P<0.05)，外泌体组内皮素1表达量较模型组显著降低(P<0.05)；(3)与模型组比较，外泌体组血脊髓屏障伊文思蓝渗出量显著减少(P<0.05)，紧密连接蛋白β-Catenin、Occludin、ZO-1的表达增加(P<0.05)；与外泌体组比较，内皮素1组伊文思蓝渗出量显著增加(P<0.05)，上述紧密连接蛋白表达量显著减少(P <0.05)；(4)结果表明，人脐带间充质细胞来源外泌体通过下调内皮素1表达来保护血脊髓屏障的通透性，起到了修复脊髓损伤的作用。
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单位山西医科大学第三医院
