人肝细胞生长因子基因真核表达质粒的构建及其在人骨髓间充质干细胞中的表达

作者：崔洁; 蒋明德; 梅浙川; 陈丽; 曾维政; 郑淑梅; 王钊

来源：中国生物制品学杂志, 2013, (01): 27-31+35.

DOI：10.13200/j.cjb.2013.01.32.cuij.013

• 骨髓间充质干细胞
• 人肝细胞生长因子
• 转染
• 表达 Bone marrow mesenchymal stem cells(BMSCs)
• Human hepatocyte growth factor(hHGF)
• Transfection
• Expression

目的构建人肝细胞生长因子(Human hepatocyte growth factor,hHGF)真核表达质粒,并检测其在人骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中的表达及其对细胞生长的影响。方法采用密度梯度法从人骨髓中分离BMSCs,流式细胞术检测细胞表型,成脂及成骨诱导其分化。PCR扩增hHGF基因,定向克隆至pEGFP-N1载体中,构建重组表达质粒pEGFP-N1-hHGF,通过电穿孔法转染BMSCs,荧光显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR及Western blot法检测hHGF基因mRNA的转录及蛋白的表达,...

• 单位
  中国人民解放军成都军区总医院; 重庆医科大学附属第二医院