结核分枝杆菌Rv3425-Rv1168c蛋白融合表达与血清学评价

作者：胡永亮; 孙卫国; 张灵霞; 梁晓博^*

来源：中国人兽共患病学报, 2019, 35(01): 1-10.

• 结核分枝杆菌
• Rv3425蛋白
• Rv1168c蛋白
• 血清学诊断

目的原核表达结核分枝杆菌Rv3425-Rv1168c融合蛋白并进行纯化,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)方法评价重组蛋白在结核病血清学诊断中的价值。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,通过重叠PCR扩增得到Rv3425-Rv1168c全核酸序列克隆至表达载体pET-24b中,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导、表达和纯化,通过ELISA检测100份确诊结核病人、20例非结核呼吸疾病患者、100份健康人血清,评价融合蛋白进行临床血清学诊断的可行性。结果 Rv3425-Rv1168c融合蛋白在原核系统内获得高表达,纯化的融合蛋白经ELISA方法测定,在血清学实验中敏感性为54%,特异性为95%。结论 Rv3425-Rv1168c融合蛋白具有较高的抗原特异性和免疫原性,在结核病血清学诊断方面具有很大的应用价值。

• 单位
  解放军第309医院; 中国人民解放军第309医院