摘要

目的探讨有限稀释克隆法培养分离人牙周膜干细胞株的实验方法,并对其生物学特性进行初步研究。方法采用有限稀释克隆法对人牙周膜细胞逐步分离筛选,观察分离出的人牙周膜干细胞形态及克隆形成情况,并对其细胞周期、STRO-1、CD146等标志蛋白的表达进行检测,检测其体外诱导成骨的能力。结果通过有限稀释法获得人牙周膜干细胞克隆具有成体干细胞的形态特征;细胞周期分析呈慢周期性;免疫细胞化学染色证实STRO-1、CD146及Vimentin均为阳性染色,矿化诱导证实该细胞可以表达多种骨蛋白标记物。结论采用有限稀释克隆法分离纯化可以获得成体干细胞所具有的细胞周期、表型及骨向分化能力等特点的牙周膜干细胞株。