伪狂犬病病毒gB和gE蛋白重组表达及抗体间接ELISA检测方法的建立

作者：张洪亮; 郝占武; 解倩倩; 王凤雪; 张志; 韩先杰; 单虎^*; 温永俊^*

来源：中国动物传染病学报, 2022, 30(01): 98-105.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.2022.01.003

• 猪伪狂犬病病毒
• gB基因
• gE基因
• 蛋白表达
• 间接ELISA

本研究利用PCR扩增伪狂犬病病毒(PRV)Bartha-K61株gB基因核心抗原区和闵A株gE基因核心抗原区，构建了重组质粒pET-32a-gB和pET-32a-gE，并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中，经IPTG诱导进行表达。SDS-PAGE分析表明，pET32a-gB蛋白分子量约为44 kDa，pET32a-gE蛋白分子量约为41 kDa。分别以gB和gE重组蛋白作为包被抗原，建立了PRV抗体间接ELISA检测方法。该方法中重组蛋白仅与PRV阳性血清发生特异性反应，检测敏感性可达到1∶1600，批内重复性和批间重复性变异系数均小于10%。本研究建立的间接ELISA方法可用于PRV抗体的监测，鉴别疫苗免疫抗体和野毒感染抗体，有利于猪伪狂犬病净化工作。

• 单位
  内蒙古农业大学; 中国动物卫生与流行病学中心; 青岛农业大学