杆状病毒GP64蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

作者:王妍; 王娟; 邓跃; 张超林; 苏晓蕊; 王同燕; 李向东; 谭菲菲*; 田克恭*
来源:中国兽医科学, 2020, 50(05): 576-581.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0090

摘要

为研究杆状病毒GP64蛋白在感染宿主过程中的表达情况,通过克隆构建含GP64基因的重组质粒,在CHO-S细胞表达重组GP64蛋白,利用野生型杆状病毒免疫BALB/c小鼠血清,筛选出重组GP64蛋白的单克隆抗体。结果表明,构建出正确的GP64重组质粒,成功表达出GP64蛋白,筛选出1株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞5B1;单克隆抗体亚类鉴定结果显示,单抗亚类为Ig G2b,轻链类型为κappa;IFA和Western-blot结果显示筛选出的GP64单克隆抗体可以与杆状病毒及GP64蛋白发生特异性结合。结论,GP64蛋白的单克隆抗体制备成功。