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摘要
用化学合成法合成了以酵母偏爱密码子编码的抗菌肽LfcinB基因片段。合成片段与酵母表达载体pPICZαA重组,构建胞外分泌表达载体pPICZαA-LfcinB,通过限制性内切酶SacⅠ酶切线性化,电击法转化毕赤酵母X-33宿主菌,Zeocin抗性筛选,经PCR检测LfcinB基因与毕赤酵母染色体稳定整合。阳性克隆经甲醇诱导表达LfcinB,诱导表达6 d,每24 h取上清1 mL,进行抑菌试验。结果表明,抗菌肽牛乳铁多肽基因已整合到酵母细胞基因组中并获得表达,经0.5%甲醇在30℃诱导48 h可产生较高抗菌活性的抗菌肽,表达产物具有较强杀菌作用。
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单位中国科学院
