周围神经感觉束和运动束在神经损伤修复过程中蛋白变化的比较蛋白质组学研究

作者:孟宪宇; 李秋红; 刘岩; 张旭; 王磊; 姜巍; 李凤久; 路来金; 陈焕新*
来源:神经损伤与功能重建, 2023, 18(10): 574-578.
DOI:10.16780/j.cnki.sjssgncj.20220112

摘要

目的:探寻周围神经感觉和运动束损伤后不同时间点的蛋白变化,为周围神经再生研究提供标志蛋白。方法:制备SD大鼠股神经运动束和隐神经(感觉束)在正常状态、Sunderland V损伤8 h和8 d时间点模型;神经断端远侧5 mm样本取材,6种样本共18组;分离、提取、纯化及定量蛋白后,应用差异凝胶电泳技术荧光标记蛋白质,凝胶图像扫描,选择差异表达>1.5倍的蛋白点定义为高差异表达蛋白;用图像分析软件BVA分析显示9块凝胶平均分离1586个蛋白点,胶上切割、酶切、点靶,质谱仪进行肽质量指纹谱(PMF)分析鉴定,识别各组间的高差异表达蛋白质图谱。应用逆转录PCR(RT-PCR)技术分析验证蛋白质组学研究的结果。结果:共有12个高差异表达蛋白点被确切鉴定:TPM1、Serpina10、NF-L、DRP-2、CaBP1、Serpina3n、Peroxiredoxin-2、Gng7、HSP70、LDHB、Enolase2、PDIA3。其中,Serpina10、TPM1、NF-L、DRP-2、CaBP1是隐神经正常状态、损伤8 h和8 d时间点时比较蛋白质组学高差异蛋白;Serpina10、Serpina3n、Peroxiredoxin-2、Gng7、HSP70、LDHB、Enolase2、CaBP1、PDIA3是股神经运动束正常状态、损伤8 h和8 d时间点时比较蛋白质组学的高差异蛋白。Serpina10和CaBP1是隐神经和股神经运动束损伤后多时间点比较蛋白质组学均出现的高差异表达的蛋白。蛋白质组学的结果与RT-PCR检测的mRNA转录水平相一致。结论:周围神经感觉束、运动束损伤后不同时间的比较蛋白质组学表达存在明显差异,Serpina10和CaBP1作为高差异表达蛋白,可能为周围神经再生研究提供新的方法。

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