嵌合抗原受体T细胞制备阶段Nalm-6细胞免疫表型及PD-1 mRNA水平变化研究

作者：彭芸; 柏涌海^*; 孙文江; 张桂丽

来源：临床军医杂志, 2020, 48(06): 661-664.

DOI：10.16680/j.1671-3826.2020.06.13

• 嵌合抗原受体
• Nalm-6细胞
• 免疫表型
• PD-1蛋白
• 急性淋巴细胞白血病

目的探讨抗CD19嵌合抗原受体(CAR)修饰的T细胞(CAR-T)制备阶段Nalm-6细胞的免疫表型及PD-1 mRNA水平变化。方法将30株急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞株Nalm-6细胞分为空白组(不作任何处理)、对照组(转染空白CD19质粒pVAX1)、CD19组(转染CD19真核质粒pVAX1-F),每组各10株。CCK-8细胞增殖实验检测Nalm-6细胞增殖率,倒置显微镜观察Nalm-6细胞转染后细胞形态,流式细胞仪检测Nalm-6细胞免疫表型及PD-L1、PD-1 mRNA水平。结果转染24、36 h时,CD19组Nalm-6增殖率低于对照组与空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。空白组Nalm-6细胞间隙分明,排列较稀疏;对照组Nalm-6细胞出现少量聚集,排列较密,有粘连现象;CD19组Nalm-6细胞出现大量聚集,排列紧密,有团状现象。CD19组CD19表达量低于对照组与空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。各组CD22表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Nalm-6细胞CD19表达随着共培养时间延长增高,而CD22表达无显著变化。CD19组PD-1、PD-L1 mRNA水平低于空白组与对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CAR-T细胞制备阶段Nalm-6细胞中,CD19表达上调、PD-1 mRNA水平下降,不能显著抑制肿瘤细胞的增殖能力。

• 单位
  上海市普陀区中心医院; 上海市第一人民医院; 中国人民解放军第二军医大学; 长征医院