葡萄VvMLO15基因的克隆、互补表达载体的构建及遗传转化

作者：柳建飞; 李娟; 李月^*; 代培红^*

来源：分子植物育种, 2023, 1-13.

• VvMLO15基因
• 白粉病
• 互补表达载体
• 木纳格葡萄

为探究VvMLO15基因的生物学功能，本研究采用RT-PCR及常规PCR的方法，以新疆木纳格葡萄叶片cDNA和野生型拟南芥Col-0叶片DNA为材料，分别克隆VvMLO15基因及拟南芥AtMLO2基因启动子(AtMLO2P)和终止子(AtMLO2T)；采用酶切连接法构建pCAMBIA1300-AtMLO2P-VvMLO15-AtMLO2T功能互补表达载体，以农杆菌介导的方法对拟南芥Atmlo2单突变体材料进行遗传转化。结果表明，在木纳格葡萄中克隆出VvMLO15基因，其CDS全长1521 bp，编码506个氨基酸；在拟南芥中克隆得到了AtMLO2P片段大小为1577 bp、AtMLO2T片段大小为493 bp，将pCAMBIA1300-AtMLO2P-VvMLO15-AtMLO2T植物互补表达载体转入拟南芥Atmlo2单突变体中获得了功能互补表达植株。本研究获得转基因株系，为筛选出木纳格葡萄的主效感白粉病基因及葡萄抗病分子育种奠定基础。

• 单位
  新疆农业大学; 生命科学学院