ASPP2调控GRP78在L-NAME诱导胎盘滋养细胞凋亡中的作用

作者：谢琳; 张辉; 丁宁; 王艳华; 吴凯; 曹军; 王青青; 刘昆; 张慧萍; 姜怡邓^*

来源：中国药理学通报, 2019, 35(06): 765-770.

DOI：10.3969/j.issn.1001-1978.2019.06.007

• p53凋亡刺激蛋白2
• 葡萄糖调节蛋白78
• N-硝基-L-精氨酸甲酯
• 胎盘滋养细胞
• 细胞凋亡
• 妊娠期高血压疾病

目的探讨p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)调控葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)在N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-nitroarginine methyl ester,L-NAME)诱导胎盘滋养细胞凋亡中的作用,为临床研究妊娠期高血压疾病提供理论依据。方法体外培养HTR-8/SVneo人胎盘滋养细胞,分为对照组(0μmol·L-1L-NAME)和L-NAME组(100μmol·L-1LNAME),干预48 h后,分别采用Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术和吖啶橙/溴化乙锭染色,检测胎盘滋养细胞凋亡水平的变化;运用Western blot检测caspase-12、GRP78和ASPP2的蛋白变化; ASPP2干扰腺病毒感染人胎盘滋养细胞后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ASPP2的mRNA表达水平,Western blot检测GRP78的蛋白表达水平;给予100μmol·L-1 L-NAME干预48 h后,Western blot和免疫荧光分别检测caspase-12和GRP78的蛋白表达。结果与对照组相比,L-NAME组胎盘滋养细胞凋亡水平明显增加(P <0. 05);吖啶橙染色显示,与对照组相比,L-NAME组细胞多数呈现鲜亮的橙色,晚期凋亡细胞数明显增加;同时caspase-12、GRP78和ASPP2蛋白的表达明显增加(P <0. 05,P <0. 01);干扰ASPP2后,caspase-12和GRP78蛋白表达明显降低(P <0. 05)。结论下调ASPP2可降低GRP78的表达,进而抑制L-NAME诱导的胎盘滋养细胞凋亡。

• 单位
  基础医学院; 宁夏医科大学总医院; 宁夏医科大学