CHD4调控端粒功能促进宫颈癌HeLa细胞生长的机制研究

作者：王倩倩; 李婷芳; 王峰^*

来源：天津医药, 2023, 51(09): 909-915.

DOI：10.11958/20222091

• HeLa细胞
• 端粒
• 宫颈肿瘤
• 细胞增殖
• 染色质域解旋酶DNA结合蛋白4

目的 探讨染色质域解旋酶DNA结合蛋白4(CHD4)通过调控端粒功能对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移的影响。方法 慢病毒感染构建CHD4稳定敲低的宫颈癌HeLa细胞系，实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot分别检测CHD4的mRNA和蛋白表达水平；将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、shCDH4-1组、shCHD4-2组，CCK-8实验检测CHD4对HeLa细胞增殖能力的影响；集落形成实验检测细胞的集落数量；划痕愈合实验检测细胞迁移能力；裸鼠荷瘤实验观察移植瘤生长情况；免疫荧光-荧光原位杂交技术检测CHD4与HeLa细胞中端粒的共定位及各组细胞中端粒的损伤情况，端粒损伤以损伤因子γH2AX与端粒的共定位表示；中期染色体-荧光原位杂交技术检测各组细胞中端粒功能的变化，端粒信号缺失（SFE）或多端粒信号（MTS）的染色体比例升高代表端粒功能障碍。结果 慢病毒感染成功构建CHD4稳定下调的HeLa细胞系（P<0.05）。与对照组相比，shCDH4-1组和shCHD4-2组的细胞增殖能力、集落形成能力、迁移能力、体内肿瘤生长能力均明显下降（P<0.05）。免疫荧光-荧光原位杂交实验表明，CHD4定位于HeLa细胞的端粒上。与对照组相比，CHD4的缺失不足以引起端粒的DNA损伤（P>0.05），但会导致HeLa细胞SFE的染色体比例明显增多（P<0.05）。结论 CHD4可通过调控HeLa细胞的端粒功能，促进宫颈癌细胞的增殖和迁移。

• 单位
  基础医学院; 天津医科大学