摘要

目的 探讨miR-10b-5p在乳腺癌细胞放疗敏感性中的作用及相关机制。方法 采用qPCR和Westernblotting检测正常乳腺细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MCF-7、SKBR-3、MDA-MB-231中miR-10b-5p mRNA、SUFU mRNA和蛋白的表达。在MDA-MB-231细胞中转染miR-10b-5p inhibitor对miR-10b-5p进行敲减,6 Gy 60Co γ-射线照射2 h,分别采用克隆形成实验和流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡水平;双荧光素酶报告实验验证靶基因SUFU,回补实验验证miR-10b-5p是否通过靶向SUFU介导乳腺癌细胞对放疗的敏感性。结果3种乳腺癌细胞系中miR-10b-5p的表达均显著高于正常乳腺细胞MCF-10A(P<0.05)。与miR-NC组相比,miR-10b-5p inhibitor组细胞增殖水平明显下降(P<0.05),凋亡水平显著上升(P<0.05)。敲减miR-10b-5p可增加野生型SUFU 3’UTR的荧光强度(P<0.05),而对突变型SUFU 3’UTR的荧光强度无明显影响(P>0.05)。此外,miR-10b-5p inhibitor组SUFU蛋白表达水平显著高于miR-NC组(P<0.05)。与miR-NC+si-NC组相比,miR-10b-5p inhibitor+si-NC组细胞增殖水平显著降低(P<0.05),miR-10b-5p inhibitor+si-SUFU#2组细胞增殖水平明显回升,且高于miR-10b-5p inhibitor+si-NC组(P<0.05)。结论 乳腺癌细胞中miR-10b-5p呈高表达,敲减miR-10b-5p可增强乳腺癌细胞对放疗的敏感性,其机制可能与靶向抑制SUFU相关。

  • 单位
    利川市人民医院