磷酸化对人中心蛋白2与蜂毒素作用的影响

作者：赵亚琴; 杨静

来源：山西大学学报(自然科学版), 2019, 42(03): 592-598.

DOI：10.13451/j.cnki.shanxi.univ(nat.sci.).2018.09.04.004

• 人中心蛋白2
• 磷酸化
• 蜂毒素

人中心蛋白2(Human centrin 2,HsCen2)是一种重要的钙离子结合蛋白。文章通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native polyarylamide gel electrophoresis,native-PAGE)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS polyarylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、DEAE-Sepharose阴离子交换层析、远紫外圆二色光谱(circular dichroism,CD)及荧光光谱的方法,在0.01mol/L Hepes(pH 7.4,25℃),研究了磷酸化修饰对HsCen2与蜂毒素(melittin)结合的影响。结果表明,蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)可以催化人中心蛋白2Ser170磷酸化反应,形成磷酸化的HsCen2(phosphorylated HsCen2,HsCen2p)。磷酸化修饰使得HsCen2的α-螺旋含量明显减少,同时疏水空腔外露程度减弱。另外,HsCen2p中加入蜂毒素使蛋白的α-螺旋含量减少。荧光发射光谱表明HsCen2p与melittin形成1∶1的复合物,其结合能力为(1.5±0.05)×105 L/mol。

• 单位
  山西大学