摘要
为了研究柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原2(EtAMA2)的分子特性与功能,利用间接免疫荧光试验、入侵抑制试验、实时荧光定量PCR、Western blot以及分泌试验等方法分析其生物学特性。结果发现EtAMA2蛋白具一个跨膜区和信号肽,在子孢子和第二代裂殖子中的转录水平明显高于未孢子化卵囊和孢子化卵囊,但蛋白仅在第二代裂殖子中被检测到;EtAMA2在游离的子孢子和第二代裂殖子中主要分布在胞质,在胞内的子孢子中主要分布在顶端。EtAMA2是一种微线体分泌蛋白,其分泌受到温度的调控。抗EtAMA2特异性抗体对子孢子入侵细胞没有明显抑制作用;将EtAMA2转染至DF-1细胞后,子孢子入侵率明显提高。本研究结果为深入研究 EtAMA2 在球虫入侵过程中的功能与作用机制奠定基础。
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