干酪乳杆菌同源整合载体的构建与鉴定

作者：郭建军; 龚小华; 袁林; 曾静; 付锦楠; 何顺华

来源：江西科学, 2015, 33(04): 491-494+518.

DOI：10.13990/j.issn1001-3679.2015.04.011

• 干酪乳杆菌
• 同源重组
• 表达载体

构建乳酸菌同源重组载体,以实现外源基因在乳酸菌中的整合型表达。PCR扩增lacZ基因表达盒lacZ-cassette,和upp基因表达盒upp-cassette,SOE-PCR扩增lacZ-P-upp,产物回收后连接到pORI28载体中,构建载体pORZP;根据干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393全基因组中lai基因序列设计引物,PCR扩增lai基因两端同源重组臂lai-up和lai-down基因序列,产物经回收后,连接至pORZP载体中,得同源重组载体pORZPlai。双酶切及DNA测序结果证实,成功构建了同源重组载体pORZP-lai,为实现外源基因在乳酸菌中的非抗性、整合型表达奠定了基础。

• 单位
  江西省科学院微生物研究所